当前位置:主页 > 新闻动态 >


ABOUT US

(86)020-81326513

微生物的糖发酵

作者:365平台 发布日期:2020-07-11 01:29



  单糖发酵是将葡萄糖,乳糖或麦芽糖等分别加入蛋白胨水培养基内,使其最终浓度为 0.75~1%。并加入一定量酚红指示剂及小倒管,制成单糖发酵管,接种细菌经37℃培养18~24小时,若能分解糖产酸则酚红指示剂由红变黄,若能分解 甲酸有CO2和H2等气体形成,小倒管内则聚集有气泡;不分解,则指示剂不变色。

  1.将伤寒杆菌,大肠杆菌按照液体接种方法分别接种于葡萄糖及乳糖发酵管内。

  3. 观察结果:由于一些细菌能分解某种糖类产酸,所以培养基中PH下降到7.0以下,在酚红指示剂的显示下,培养基颜色由红变黄。产酸者以“+”表示,如果同 时产生气体,则培养基中小倒管内有气泡出现,此乃产酸又产气,以“⊕”表示,不分解,则指示剂不变色,用“-” 表示。

  有些细菌如产气杆菌,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧,生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中被氧化为二乙酰,再与培养基内胍基结合,生成红色化合物,V—P试验阳性。

  3.试剂:V-P试剂[40%氢氧化钾水溶液(内含0.3%肌酸)和6%α-奈酚酒精溶液]。

  2. 置37℃培养48小时后,取出分别加入KOH1ml和α-奈酚溶液1ml ,摇匀,静置试管架上5~15分钟。

  某 些细菌如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸,继而分解为甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基PH值降至4.5以下,加入甲基红指示剂呈红色,此为阳性反应;若产酸 量少或产生的酸进一步转化为醇、醛、气体和水等,则培养基的酸碱度仍在PH 6.2以上,加入甲基红指示剂呈现黄色,为阴性反应。

  2. 置37℃培养2~3天取出,分别滴加甲基红试剂2~3滴,混匀,观察结果。

  枸 橼酸盐培养基系一综合性培养基,其中枸橼酸钠为唯一碳源,磷酸二氢铵为唯一氮源。一般细菌能利用磷酸二氢铵作为氮源,但不一定能分解枸橼酸盐取得碳源。因 此,根据可否利用枸橼酸盐来鉴别细菌,如产气杆菌可利用枸橼盐作为碳源,细菌生长繁殖,形成菌苔,分解枸橼酸盐生成碱性碳酸盐,使培养基PH上升到7.0 以上,由绿色变为深兰色,为枸橼酸盐利用试验阳性;而大肠杆菌则不能分解枸橼酸盐,得不到碳源,不能生长,无菌苔形成,培养基颜色不发生变化,为枸橼酸盐 利用试验阴性。

365平台